Uji Lemak dan Protein

A.  Data

Tabel Pengamatan Pengaruh Empedu terhadap Lemak

No	Larutan	Perlakuan
		Sebelum	Sesudah
1.	Empedu+ aquades+ minyak	-       Minyak dan empedu tercampur -       Berwarna hijau tua	-        Minyak dan empedu terpisah -        Berwarna hijau tua (dibagian bawah) dan kuning cerah (dibagian atas) -        Gumpalan minyak +++
2.	Aquades+ minyak	-        Minyak dan aquades tercampur (homogen) -        Berwarna kuning cerah	-        Minyak dan aquades terpisah -        Berwarna bening (bagian bawah) dan kuning (bagian atas) -        Gumpalan minyak ++

Tabel Pengamatan Identifikasi Protein

Tabung	Larutan	Warna		Keberadaan Protein
		Sebelum	Sesudah
1.	1,5 mL Larutan Albumin	Kuning cerah	Ungu +++++	Ada
2.	1,5 mL Aquades	Bening	Biru cerah	Tidak ada
3.	Susu	Putih	Ungu +++	Ada
4.	Kacang	Putih	Ungu ++	Ada
5.	Tahu	Putih	Ungu ++++	Ada
6.	Tempe	Putih	Ungu ++	Ada

Tabel Pengamatan Pembuktian Adanya Tripsin

Tabung	Larutan	Warna Larutan		Keberadaan Tripsin
		Sebelum	Sesudah
A	Susu+ ekstrak usus+ biuret	Putih	Hijau Kecoklatan	Ada
B	Susu+ aquades+ biuret	Putih	Hijau tua	Ada

B.  Analisis

Berdasarkan tabel diatas diketahui bahwa pada uji lemak dan protein terdapat pengamatan pengaruh empedu terhadap lemak, identifikasi protein, dan pembuktian adanya tripsin. Sedangkan pada uji karbohidrat terdapat 4 pengamatan yaitu identifikasi karbohidrat, pembuktian amilase dan maltase, dan identifikasi pati (Oligosakarida).

Pada pengamatan pengaruh empedu terhadap lemak menggunakan ikan nila sebagai sampel. Pada tabung A terisi larutan empedu, aquades dan minyak. Tabung A sebelum dan sesudah diberi perlakuan yaitu dari warna hijau tua menjadi dua bagian warna (hijau tua (bagian bawah) dan kuning cerah (bagian atas)). Serta yang awalnya tercampur sesudah diberi perlakuan minyak dan aquades terpisah dan gumpalan minyak +++. Sedangkan pada tabung Bterisi aquades dan minyak. Tabung B sebelum dan sesudah diberi perlakuan yaitu dari warna kuning cerah menjadi  dua bagian warna (bening (bagian bawah) dan kuning (bagian atas)). Serta yang awalnya tercampur sesudah diberi perlakuan minyak dan aquades terpisah dan gumpalan minyak ++.

Pada pengamatan identifikasi protein, digunakan larutan pembanding yaitu larutan albumin dan aquades sebagai larutan kontrol. Adapun larutan sample yaitu  larutan susu, kacang, tahu, dan tempe. Pada larutan albumin, warna sebelum diberi perlakuan adalah kuning cerah dan menjadi ungu +++++. Pada aquades sebelum diberi perlakuan berwarna bening menjadi berwarna biru cerah. Pada susu, warna sebelum ada perlakuan adalah putih dan berubah menjadi ungu +++. Pada kacang dan tempe, warna sebelum dan sesudah adalah sama, yaitu putih dan berubah menjadi ungu ++. Pada tahu, warna sebelum diberi perlakuan yaitu putih menjadi ungu ++++ setelah diberi perlakuan. Berdasarkan hasil perubahan warna, diketahui bahwa larutan albumin, susu, kacang, tahu, dan tempe terindikasi adanya senyawa protein karena adanya perubahan warna menjadi ungu. Adapun aquades tidak terindikasi, karena tidak adanya perubahan warna atau tidak berubah menjadi warna ungu setelah diberi perlakuan.

Pada pengamatan pembuktian adanya tripsin dengan menggunakan bahan susu yang terindikasi protein. Pada tabung A, larutan susu diberi ekstrak usus dan biuret terjadi perubahan warna yaitu dari putih menjadi hijau kecoklatan. Sedangkan, pada tabung B, larutan susu diberi aquades dan biuret terjadi perubahan warna yaitu dari putih menjadi hijau tua. Berdasarkan hasil pengamatan yang terindikasi adanya tripsin yaitu kedua tabung tersebut baik tabung A maupun tabung B. Tetapi warna yang lebih mendekati dengan adanya tripsin yaitu tabung A.

C.  Pembahasan

Pada pengamatan ini terlebih dahulu kami membuat ekstrak usus untuk melanjutkan pengamatan lainnya. Dalam pengamatan ini kami menggunakan ikan nila. Fungsi ekstrak usus ikan nila untuk memudahkan mengetahui keberadaan enzim tripsin, amilase dan maltase.

Keberadaan cairan empedu dalam saluran pencernaan hewan sangat penting. Cairan empedu membantu pencernaan semua makanan berbahan dasar lemak dan turunannya. Bila garam empedu bergabung dengan kolesterol, gliserid, dan asam lemak, maka akan terbentuk micel yang dapat diserap oleh dinding usus. Karena itu kekurangan cairan empedu dapat menurunkan pencernaan lemak dan kekurangan vitamin-vitamin yang hanya larut dalam lemak , seperti vitamin A, D, E, dan K. Empedu merupakan cairan bersifat basa yang pahit dan berwarna hijau kekuningan karena mengandung pigmen bilirubin, biliverdin, dan urobilin, yang disekresikan oleh hepatosit hati pada sebagian besar vertebrata. Pada beberapa spesies, empedu disimpan di dalam kantung empedu dan dilepaskan ke usus dua belas jari untuk membantu proses pencernaan makanan. Dalam hal ini berarti hasil pengamatan tidak sesuai dengan teori yang ada karena pada hasil pengamatan empedu+aquades+minyak sesudah dapat perlakuan terpisah antara minyak dan empedu. Tetapi pada teori, aquades dan minyak dapat menyatu karena terdapat cairan empedu. Garam-garam empedu yang terkandung di dalam cairan empedu berperan melarutkan minyak dalam aquades, yakni dengan cara membuat stabil emulsi lemak yang berasal dari minyak. Hal ini dikarenakan kurang lama waktu pengocokan sehingga belum terlihat dengan jelas larutannya. Sedangkan pada pengamatan aquades+minyak sudah sesuai dengan teori bahwa sesudah perlakuan minyak dan aquades terpisah karena masa jenis minyak lebih kecil dibandingkan aquades.

Identifikasi protein dilakukan untuk menguji larutan pembanding dan larutan sampel yang mengandung protein. Larutan yang akan diuji dicampurkan dengan pereaksi biuret kemudian dikocok. Larutan protein dibuat alkalis dengan NaOH kemudian ditambahkan larutan CuSO4 encer. Uji ini untuk menunjukkan adanya senyawa-senyawa yang mengandung gugus amida asam yang berada bersama gugus amida yang lain. Uji ini memberikan reaksi positif yaitu ditandai dengan timbulnya warna merah violet atau biru violet. Pada larutan pembanding yaitu larutan albumin menunjukkan hasil yang positif. Terbentuknya larutan berwarna ungu. Hal ini terjadi bila protein bereaksi dengan ion Cu²⁺ dalam suasana basa. Pereaksi  biuret terdiri dari CuSO₄ dalam aquades dan NaOH. CuSO₄ sebagai penyedia ion Cu²⁺ yang nantinya akan membentuk kompleks dengan protein. Pada percobaan ini juga menggunakan larutan sample, yaitu susu, kacang, tahu dan tempe. Pada keempat larutan ini terjadi perubahan warna menjadi ungu setelah diberi pereaksi biuret. Warna ungu yang terjadi akibat larutan protein berikatan dengan Cu²⁺. Keempat larutan menunjukkan hasil yang positif mengandung protein. Sedangkan pada aquades setelah diberi pereaksi biuret tidak berubah warna menjadi ungu tetapi menjadi biru cerah. Hal ini bahwa aquades  menunjukkan hasil negatif, tidak mengandung protein. Reaksi yang terjadi yaitu:

Tripsin merupakan salah satu protease atau enzim yang menghidrolisis protein. Tripsin merupakan endopeptidase yang bentuk inaktifnya disebut tripsinogen. Tripsin bekerja optimum pada pH asam / 1,8 (1,2 - 2). Tripsin memiliki fungsi untuk mengubah protein menjadi polipeptida. Struktur tripsin yaitu:

Hal yang dilakukan pertama kali adalah tabung reaksi A dan B diisi dengan 1 ml sampel yang mengandung protein. Setelah dipanaskan dan ditunggu sampai dingin, tabung reaksi A diberi 1 ml ekstrak usus dan tabung reaksi B diisi 1 ml aquades. Setelah didiamkan selama 5-10 menit ditetesi biuret. Biurt untuk menguji adanya kandungan tripsin di dalamnya. Dari pengamatan yang telah dilakukan diperoleh hasil berupa perubahan warna pada larutan, baik pada tabung A maupun pada tabung B. Pada awalnya, kedua tabung berisi larutan yang berwarna putih (larutan susu), tetapi setelah diberi perlakuan, larutan di dalam tabung A berubah warna menjadi hijau kecoklatan. Secara teori bahwa terindikasi adanya enzim tripsin yaitu akan terlihat perubahan warna menjadi kuning. Dalam pengamatan ini berarti terindikasi adanya enzim tripsin (menunjukkan hasil positif). Adapun pada tabung B berwarna hijau tua. Hasil percobaan ini menunjukkan bahwa tabung B tidak terdapat enzim tripsin tetapi pada tabel pengamatan tertulis bahwa keberadaan enzim tripsin ada. Hal ini dikarenakan kurang pengetahuan praktikan dalam mengambil kesimpulan.